摘要：
为建立淡水鱼病毒性神经坏死病病毒（VNNV）高效检测技术，解决现有方法场景适配问题，本研究优化并对比荧光定量RT-PCR与重组酶聚合酶扩增（RPA）两种方法。基于VNNV外壳蛋白基因保守序列设计引物探针，通过单因素试验优化体系，从特异性、灵敏度、重复性及临床适用性验证性能。结果显示，两种方法均无交叉反应，对50份临床样本总符合率达100%，重复性良好。荧光定量RT-PCR具备定量能力，依赖精密设备，适用于实验室分析；RPA检测快速、操作简便，适用于基层筛查。本研究构建的互补检测体系可满足不同场景需求，为VNNV的早期防控提供技术支撑。
